外泌體制品中應(yīng)盡量減少游離蛋白、聚合酶(如RNase)和雜質(zhì)的存在,建議使用純化后的外泌體(通過超速離心、尺寸排阻色譜法SEC純化)。外泌體制品濃度要適宜,一般在1e10 - 1e11 particles/mL范圍內(nèi)較為常見。外泌體制品包材選用低蛋白吸附的凍存管或西林瓶。每管的分裝體積不宜過大或過小。通常0.5 - 2 mL較為合適,以確保熱傳導和干燥效率。體積過大可能導致干燥不完。
外泌體凍干工藝過程中的要點:
1. 預凍時快速冷凍(>1°C/min)有助于形成小冰晶,減少對外泌體膜的機械損傷。
2.一次干燥板層溫度要適合,建議設(shè)定在 -30°C 至 -45°C 之間,合適的真空是升華的動力。
3. 凍干總時長具體取決于樣品體積和配方。必須確保所有冰晶升華。
外泌體凍干時要選擇適合的凍干機,一批凍干量要滿足前期生產(chǎn)每批2100瓶,放大生產(chǎn)至少1萬瓶的產(chǎn)能,外泌體凍干機整機為304不銹鋼材質(zhì),前箱后阱,潔凈度好,可做穿墻,可連續(xù)長時間運行,技術(shù)服務(wù)帶有凍干工藝摸索,凍干工藝優(yōu)化,凍干生產(chǎn)放大等。另外外泌體凍干機整機性價比好,使用壽命在15年以上。外泌體凍干機出口澳大利亞、德國、英國、美國等,凍干機出口時可提供遠程的凍干工藝技術(shù)指導,遠程的設(shè)備操作使用維護等。